菊花的繁殖-组织培养
组织培养是近代新的科技方法,就是利用植物的某一离体器官(如根、茎尖、叶片等)、组织或细胞产生愈伤组织并经诱导、分化、生长和发育,使其形成完整的新植株的一种繁殖方法。菊花的组织培养多用茎离体培养,此法科学、先进、快速、生产出的苗健壮,少病虫害,产业化育苗多用此法,但科技含量相对较高,用设备多,操作复杂,相对成本高,今尚不普及。
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1、培养基:一般采用MS培养基,因为这一培养基包含的营养物质丰富,有较高的硝酸根离子(NO3-)、钾离子(K+)、铵离子(NH4+)等离子浓度。采用幼芽培养时,每升添加6-苄氨基腺嘌呤(BA)1-3mg,萘乙酸(NAA)0.1-1.0mg,生根培养时添加NAA0.1-0.3mg,酸碱度调至PH值5-6。MS培养基共有14种化合物组成,现列于下:
大量元素:
化合物名称 化学式 含量
硝酸钾 KNO3 1 900 mg/L
硝酸铵 NH4NO3 1 650 mg/L
硫酸镁 MgSO4·7H2O 370 mg/L
磷酸二氢钾 KH2PO4 1 700 mg/L
氯化钙 CaCl2·2H2O 440 mg/L
微量元素:
化合物名称 化学式 含量
硫酸铁 FeSO4·7H2O 27.8mg/L
硫酸锰 MnSO4·4H2O 22.3 mg/L
硫酸锌 ZnSO4·7H2O 8.6 mg/L
硫酸铜 CuSO4·5H2O 0.025 mg/L
硼酸 H3BO3 6.2 mg/L
碘化钾 KI 0.83 mg/L
氯化钴 CoCl2·6H2O 0.025 mg/L
钼酸钠 Na2MoO4·2H2O 0.25 mg/L
乙二氨四乙酸二钠 Na2-EDTA·2H2O 27.3 mg/L
2、取材与消毒:茎尖是主要的培养部位,也可采用茎段、花托、花瓣、叶片等,用于快速育苗的可采用大于1mm以上的茎头,培养脱毒苗宜采用小于0.6mm的茎尖培养。将田间取回的材料先用肥皂水洗净,再用饱和漂白粉过滤液或浓度为千分之一的升汞液浸泡灭菌,通常多用漂白粉,其毒性小,灭菌时间长,有效成分氯易挥发,处理后用无菌水冲冼3次即可接种。如用升汞,灭菌时间宜短,无菌水冲冼至少要5次以上才能接种。
3、接种与培养:要建密封接种室,用于接种等无菌操作,避免染菌,若没有接种室,也可以用简单的接种箱进行接种。在净化工作台上,将经过灭菌的材料在消毒滤纸上切成1mm以上的小块,放入培养液瓶中,培养无病毒苗,保持温度在20℃左右,每天照明10-12小时。经过一段时间的培养,将具有根、叶的菊苗脱瓶冼去培养基,移栽于蛭石或砂的基质中,用半量的MS培养液补肥,罩以有孔的塑料薄膜,薄膜厚度应在0.6mm以下),接种在灭菌的诱导培养基(基本培养基+激动素0.2mg+萘乙酸0.002mg)上,移入培养室管理,温度保持在26-27℃,待生芽后可不断继代培养,扩大繁殖系数。诱导出的芽再转移到生根培养基(基本培养基+萘乙酸0-0.002㎎)上,用塑料袋保温保湿,放在荫棚下,三至五天后除去塑料袋,并在晨夕中见光,成活后移入花盆,转入正常培养。
由于这些植物的幼苗在试管中得到了充足的养分,所以植株生长健壮,发育良好,抗病力强,叶色浓绿,花朵肥大,并能保持原品种的性状,繁殖速度快、数量多,是产业化发展的必走之路,值得大力推广。