菊花茶冲泡工艺优化
摘 要：以茶汤中的绿原酸和总黄酮含量为测定指标，确定菊花茶**冲泡工艺。采用高效液相色谱法测定绿原酸的含量，分光光度计法测定总黄酮的含量。结果表明，当用 120mL 的 100℃的水冲泡 2g 菊花茶 1 次、冲泡时间为15 mi n 时，茶汤中的绿原酸和总黄酮含量**，此时的菊花茶汤中功效成分含量**。关键词：绿原酸；菊花茶；冲泡；总黄酮
在东方国家，菊花是一种具有很高药用价值的植物，通常被用来治疗高血压和一些传染性疾病，例如肺炎、结肠炎、口腔炎、红斑、发热等[ 1 - 3 ] 。在韩国，菊花也用来治疗发烧、眩晕等病症[ 4 ] ，而且菊花也可加工成饮料[ 5 ] 。在中国，人们认为菊花茶可以败火，喜欢四季饮用菊花茶，尤其是在夏天，但是人们对菊花茶中的功效成分以及**冲泡工艺都知之甚少。
总黄酮是菊花茶中的一类功效成分，能降血压，预防心脑血管疾病，通常作为临床药物用来治疗高血压和心脑血管疾病[ 6 ] 。绿原酸也是菊花茶中的一种功效成分，是咖啡酸和奎宁酸的缩合物[ 7- 8] ，它可以抗菌、抗病毒，通常被用来作为菊花茶质量等级的标准[ 9 ] 。菊花茶中的总黄酮和绿原酸的浸提也曾见诸报道[1 0- 12 ]，但是这些浸提主要采用化学试剂辅助微波、超微粉碎等工艺进行，没有从菊花茶作为茶饮的角度出发，本实验考察影响贡菊花茶冲泡效果的因素，以期为优化浸提工艺和冲泡效果提供一定的参考依据。
1材料与方法
1.1材料、试剂与仪器
贡菊(产于安徽省) 北京马连道茶叶城；绿原酸标准品美国 S i g m a 化学试剂公司；甲醇( 色谱纯) 、NaNO2、Al(NO3)3、NaOH、NaH2PO4(均为分析纯) 北京化学试剂公司。Elite -AAK 氨基酸分析系统 大连伊立特公司；WFZ UV-2000 型紫外 - 可见分光光度计 尤尼柯(上海)仪器有限公司。
1.2 方法
1.2.1 冲泡时间对菊花茶汤中的绿原酸和总黄酮含量的影响
称取 2g 贡菊放于三角瓶中，用 200mL 100℃的水冲泡 5min(100℃水浴锅中操作)，抽取 20mL 的茶汤备用，继续加热，10min 时再收集 20mL 茶汤，15min 收集 20mL
茶汤，20min 收集**后一次 20mL 茶汤备用。将 4 个不同时间段收集的茶汤放置至室温作为样品备用。
1.2.2 冲泡次数对绿原酸和总黄酮含量的影响
称取 2g 贡菊，用 200mL 100℃的水冲泡 5、10、15、20min，收集每个时段 20mL 的茶汤样品，放至室温待用。将剩余的茶汤倒掉，在茶渣中再加入 200mL 100℃
的水冲泡 5 、1 0 、1 5 、2 0 m i n ，进行第 2 次浸泡，依次收集每个时间段的 20mL 的茶汤，放至室温备用。第3次冲泡重复第 2 次冲泡的操作，得到第 3 次冲泡的 4 个时间段的样品。
1.2.3 冲泡水温对绿原酸和总黄酮含量的影响
称取 2g 贡菊，分别用 60 、80 、10 0℃的水进行冲泡( 在相应温度的水浴锅中进行) ，时间间隔分别为 5 、1 0 、1 5 、2 0 m i n ，冲泡 3 次，收集每次、每个时段、每个温度下的样品备用。
1.2.4 冲泡水量对绿原酸和总黄酮含量的影响
分别称取 2g 贡菊，用 120、160mL 和 200mL 100℃ 的水进行冲泡。分别收集浸泡 5 、1 0 、1 5 、2 0 mi n 后的茶汤 2 0 m L ，分别浸泡 3 次，收集茶汤样品。
1.2.5 总黄酮的测定
本方法对白少岩等[ 1 3 ] 的总黄酮的测定方法进行改进。绿原酸标准品用甲醇溶解，得到不同浓度的标准品溶液。分别取不同浓度的标样 2mL，置于 10mL 的容量瓶中，加入 0.3mL 10g/100mL 的 NaNO3 溶液，混合均匀，静置 6min，然后再加入 0.3mL 10g/100mL 的 Al(NO3)3 溶液，混和均匀，静置 6min，加入 4mL 4g/100mL 的 NaOH溶液，用 30% 乙醇溶液进行定容，再静置 10min ，在510nm 波长处进行分光光度计检测，得到绿原酸标样浓度与吸光度之间的相关方程，总黄酮含量以绿原酸计，结果以干质量计算。样品的检测过程同标样的过程，每个样品检测 3 次。
1.2.6 HPLC 法测定菊花茶汤中的绿原酸含量
本方法对卢金清等[14]和李宗等[15]报道的方法进行改进。分析柱采用大连依利特的 Sin ochrom ODS -BP C18(4.6mm × 200mm，5μm)，柱温为 30℃，流动相是pH2.65 NaH2PO4- 水(55:45，V/V)，流速为 0.8mL/min，检测器为 U V230 Ⅱ，进样量为 10μL 。
2结果与分析
2.1 冲泡时间对绿原酸和总黄酮含量的影响
2.1.1 冲泡时间对总黄酮含量的影响
总黄酮是菊花茶中一类功能性成分，具有很强的抗氧化功能，对动脉硬化具有重要的预防作用[ 6 -7 ] 。从图1可以看出，浸提时间从 5～20min，总黄酮的含量是依次上升的，无论是浸提1次还是3次。虽然总黄酮含量随浸提时间延长而增加，但是每次的增加频率是不同的，表1给出了总黄酮含量与冲泡时间之间的相关系数(SPSS 的双尾检验)，冲泡第1 次时，总黄酮与冲泡时间之间的相关系数为0.983，在α＝ 0.05 水平上显著，冲泡第 2 次的系数为0.944，第3次为0.873。由此可见,总黄酮与冲泡时间之间的相关系数随着冲泡时间的延长而有所下降，并且冲泡时间越长，冲泡时间对总黄酮的影响越小，这主要是因为在**初冲泡时大部分总黄酮已经浸提出来，随着冲泡次数和冲泡时间的延长，浸提出来的总黄酮越来越少，故受时间的影响也在变弱。
